黄蜀葵花源性细胞外囊泡样颗粒（AM-EVLPs）作为新型天然纳米递送体系具有精准保护足细胞的效果。该研究旨在借助改良型糖尿病肾脏疾病（DKD）大鼠模型和高糖（HG）诱导的足细胞模型进一步验证AM-EVLPs在体内外靶向性保护足细胞损伤的作用，进而基于“线粒体-内质网耦联”以及肿瘤蛋白53（P53）介导的氧死亡病理机制探究其治疗靶点。首先，采用超速离心结合密度梯度离心法从新鲜黄蜀葵花花瓣中提取AM-EVLPs；其次，在体内研究中，建立改良型DKD大鼠模型，待造模成功后，将模型鼠随机分为模型组、低剂量AM-EVLPs（L-AM-EVLPs）组、高剂量AM-EVLPs（H-AM-EVLPs）组以及黄蜀葵花总黄酮（TFA）组，分别给予相应药物，连续4周；在体外研究中，先用高糖（HG）处理鼠类足细胞（MPC5细胞），再分别用L-AM-EVLPs、H-AM-EVLPs、恩格列净（EMPA）、P53小干扰RNA（P53-siRNA）以及P53过表达慢病毒（P53-OE）进行干预。借助DKD模型鼠，观察了血糖、尿白蛋白及肝肾功能相关指标，检测了肾小球组织病理特征、足突及线粒体超微形态和足细胞特异性结构分子[足突蛋白（podocin）、肾病蛋白（nephrin）]蛋白表达水平、肾脏组织活性氧（ROS）水平及氧死亡相关蛋白P53、Kelch样ECH相关蛋白1（KEAP1）、磷酸甘油酸变位酶家族成员5（PGAM5）、凋亡诱导因子/线粒体相关1（AIFM1）的蛋白表达水平。此外，还分析了糖尿病肾脏蛋白质组学差异表达谱。借助HG环境下的足细胞模型，检测了podocin、nephrin蛋白表达水平、线粒体-内质网耦联程度、1型肌醇1，4，5-三磷酸受体（IP3R1）-葡萄糖调节蛋白 75（GRP75）-电压依赖性阴离子通道蛋白1（VDAC1）复合物结合强度、线粒体钙离子(Ca2+)浓度、线粒体活性氧（mtROS）水平以及Kelch样ECH相关蛋白1（KEAP1）/磷酸甘油酸变位酶家族成员5（PGAM5）/凋亡诱导因子/线粒体相关1（AIFM1）信号轴关键信号分子的蛋白表达水平。体内研究结果显示，AM-EVLPs能剂量依赖性地改善模型鼠尿白蛋白、血清尿素氮（BUN）及血清肌酐（Scr）水平；减少肾小球细胞增殖、ECM和胶原沉积；改善足突融合及线粒体超微结构损伤；上调podocin、nephrin蛋白表达水平；降低mtRO...
(8.0+极速模式)